一般的荧光染料不能有效地用于检测膜上的蛋白或者塑料培养皿中的蛋白,因为它们的激发和检测波长位于可见光谱区,易形成膜(NC膜、PVDF膜、尼龙膜)的高背景荧光干扰。而在红外波长区检测荧光信号,具有背景低,信噪比高的特点。因此,Odyssey可以用于检测膜上和微孔板上的蛋白或核酸,并对其进行精确的定量分析。
直接检测,操作简单:杂交以后直接扫描成像,无需胶片、暗房或复杂的染色及显色过程。
双色成像:两种不同波长的红外染料对生物分子(蛋白或核酸)标记和同时检测。双色输出。两个靶分子同时检测,减少了工作量,而且杂交条件均等,便于两个数据的对比,可进行准确的量化分析。
高灵敏度:对于Western blots检测,灵敏度可达皮克级(pg)。
极宽的线性范围:在红外荧光区域,背景荧光信号大大低于可见荧光区域,因此,直接红外检测具有更宽的线性范围,可以得到清晰的、锐利的条带,一次杂交中的强信号和弱信号都可以清晰成像,从而提高了实验重复性和定量精确性。
实验成本低:Western成本低于常规化学发光,因为无需胶片和反应底物,而且二抗可重复使用进一步降低实验成本。
功能强大的软件系统:提供数据管理、定位蛋白大小和定量分析等完整功能
操作流程
双色Western blots分析:蛋白的研究不仅有量化的要求,修饰性研究是很重要的一块。Odyssey的双色功能极大方便了蛋白表达丰度和修饰化蛋白的研究。
双色 EMSA(电泳迁移率变化分析):Odyssey 可以直接在凝胶上进行两个启动子的分析,不需要印迹到膜上,方便、快捷、无放射性危险。
微孔板In-Cell Western分析:Odyssey可以直接在96或384孔板对细胞内目标蛋白进行精确定量,是高通量信号传导通路分析和药物筛选的最佳选择。
组织切片扫描分析
1)高准确性的定量:宽广的线性范围,定量能力比化学发光法高2到3个数量级
2)高灵敏度:效果等于或者好与ECL,zei低检测限低于pg级
3)双色检测:在一次杂交中同时检测两种目的分子
4)清晰的数据:过强的信号不会产生“吹泡”效应
5)简单方便:过程简单,只需一次扫描成像,无需反复压片曝光,省时
6)直接检测:不需要X光片,不需要暗房,节省成本
7)应用广泛:可以扫描膜、凝胶、玻片、微孔板
8)双色Western Blot不仅有相当高的灵敏度和zei佳的定量精确性,还能够进行双色检测功能,可以检测两种目标蛋白,例如:磷酸化蛋白和去磷酸化蛋白
9)双色In Gel Western可以实现在聚丙烯酰胺凝胶上进行直接Western blot检测
10)双色EMSA检测可以检测标记后的核酸,研究不同的DNA片段与蛋白质的相互作用
11)微孔板In Cell Western分析,可以在96孔或者384孔板上进行胞内蛋白检测,免去了传统Western需要进行裂解细胞,凝胶点样,电泳和转膜的工作。
包括的基本配置:
1)700通道激光器:波长为680nm的固态激光器
2)800通道激光器:波长为780nm的固态激光器
3)检测器:雪崩式光电二极管